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陰性染色產(chǎn)生的原因
更新時間:2015-07-31   點擊次數(shù):1605次

我先用石蠟切片做了5次,結果一直不理想(表現(xiàn)為未見特異性強染色);近幾日,我又切了冰凍切片,做了2次,終于基本成功了。在這個過程中,我對免疫熒光染色技術有了全新的認識,而前些天發(fā)出免疫熒光求助貼,回復的很少,所以有必要加強對免疫熒光方面的討論),不妥之處敬請指正。有人會問酶免疫組化做的好好的,為何要做免疫熒光?其實,這也是我以前思考的難題,現(xiàn)在我認為可能胞膜蛋白含量不高,用普通免疫免疫組化可能做不出來,需要敏感的免疫熒光方法來進行蛋白檢測(我是看許多外文文獻都是這樣做的,因此選擇免疫熒光染色。)抗體

陰性染色產(chǎn)生的原因有:
(1)一抗和二抗?jié)舛炔缓线m或孵育條件不妥。

(2)熒光素提前衰退。熒光素質量不佳或操作過程中沒有注意避光等防止熒光素衰退的事項。

(3)血清封閉時間過長。

(4)抗體稀釋液PH值不合適,影響抗原抗體反應。

(5)組織切片不平、裂片或脫片很嚴重,易引起大塊陰性著色。

(6)組織標本不新鮮或已經(jīng)冷凍組織制成的切片中抗原易彌散,易引起本來表達的部位陰性染色或弱著色。

(7)熒光顯微鏡不會使用,激發(fā)波長選擇錯誤。

Mouse Lysozyme,LZM ELISA Kit   小鼠溶菌酶  規(guī)格:  48T/96T
Mouse lymphocyte factor ELISA Kit  小鼠淋巴細胞因子  規(guī)格:  48T/96T
Mouse Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit  小鼠乳酸脫氫酶  規(guī)格:  48T/96T
Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit  小鼠角化細胞內(nèi)分泌因子/雙調(diào)蛋白  規(guī)格:  48T/96T
Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA kit   小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白6  規(guī)格:  48T/96T
mouse IgM ELISA kit  小鼠免疫球蛋白IgM  規(guī)格:  48T/96T
mouse IgG ELISA kit  小鼠免疫球蛋白IgG  規(guī)格:  48T/96T
mouse IgA ELISA kit  小鼠免疫球蛋白IgA  規(guī)格:  48T/96T
Mouse eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit   小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白  規(guī)格:  48T/96T
Mouse D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA Kit   小鼠D-乳酸脫氫酶  規(guī)格:  48T/96T
抗體Mouse Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type I collagen, I CTP ELISA Kit  小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽  規(guī)格:  48T/96T
Mouse Cluster of differentiation 3,CD3 ELISA Kit  小鼠CD3分子  規(guī)格:  48T/96T
Mouse Cluster of differentiation 19,CD19 ELISA Kit  小鼠CD19分子  規(guī)格:  48T/96T
Mouse c-jun ELISA Kit   小鼠c-jun  規(guī)格:  48T/96T

 

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