欧美巨屌桶进女人屁股爽,噜噜噜亚洲色成人网站∨,天干天干啦夜天干天天爽,亚洲少妇综合区

技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 細(xì)菌中分離純化質(zhì)粒DNA
細(xì)菌中分離純化質(zhì)粒DNA
更新時(shí)間:2012-01-06   點(diǎn)擊次數(shù):1451次

1. 細(xì)胞壁的消化,將細(xì)菌溫育在裂解液中去除細(xì)胞壁中的肽聚糖。通常在等滲的情況下進(jìn)行此步,以防止細(xì)胞漲破釋放出染色體DNA分子。注意,革蘭氏陽(yáng)性菌對(duì)裂解酶相對(duì)不敏感,需要額外的處理以使酶到達(dá)細(xì)胞壁層,例如,可采用滲透壓休克或保溫在螯合劑中,如EDTA。EDTA也能使一些細(xì)菌的脫氧核糖核酸酶失活,以防止在提取過(guò)程中,質(zhì)粒DNA降解。

2. 利用強(qiáng)堿(NaOH)和其他試劑,如十二烷基磺酸鈉溶解細(xì)胞膜并使蛋白質(zhì)部分變性。再中和此溶液使不溶性染色體DNA沉淀,質(zhì)粒DNA存于溶液中。

3. 移去其他的大分子物質(zhì),特別是RNA和蛋白質(zhì),這可利用核糖核酸酶和蛋白酶進(jìn)行酶促消化。另一些化學(xué)純化步驟可增加質(zhì)粒DNA的純度,例如可將提取物同水飽和酚或酚/氯仿混合物混合,以除去蛋白質(zhì)。再離心,DNA留在上面的水層,蛋白質(zhì)則分離在下面的有機(jī)溶劑層。重復(fù)酚/氯仿提純的循環(huán)可降低樣品中這些大分子蛋白的含量到zui少。還可通過(guò)等密度的CsCl梯度離心法得到純化的DNA。

4. 利用體積分?jǐn)?shù)為70%左右的乙醇沉淀DNA,離心,得到的DNA沉淀,再用體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇洗,其中的水將除去先前階段的鹽污染。經(jīng)過(guò)提純的DNA,可冷凍保存?zhèn)溆?,或重新溶解在緩沖液中。

 

 

化工儀器網(wǎng)

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
当涂县| 绩溪县| 苍南县| 阳江市| 延津县| 涟源市| 吴桥县| 蒙自县| 高淳县| 合阳县| 凤阳县| 连州市| 青州市| 油尖旺区| 郧西县| 谢通门县| 乌拉特后旗| 南投县| 云和县| 阳江市| 藁城市| 崇文区| 汽车| 东乡族自治县| 偏关县| 尚义县| 云林县| 弥勒县| 亳州市| 金坛市| 班玛县| 宜都市| 丰城市| 深州市| 陆丰市| 嘉义市| 庐江县| 凭祥市| 德阳市| 洛川县| 寿阳县|